酶底物法检测基本原理与方法优势

来源：西安海研生物科技有限公司 | 发布时间：2020/9/11 15:29:51

西安海研程控定量封口机厂家给详细介绍一下酶底物法检测基本原理与方法优势：

一、基本原理

粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪便。在44.5℃温度下能生长并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称粪大肠杆菌。

用提高培养温度的方法，造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件，使培养出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群，从而更准确地反映出水质粪便污染的情况。粪大肠菌群的测定可以用酶底物法。

二、方法优势

1.无需在无菌室内操作。

2.手工操作时间小于1分钟。

3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。

4.24小时即可完成定性定量分析，无需验证试验。

三、配件以及技术方案：

针对酶底物法检测的原理采购相应的设备。用途如下：

程控定量封口机：用于定量检测盘的封口。

酶底物检测试剂：用于选择性检测水中的目标细菌。

51或97定量检测盘：用于判断目标微生物数量。

100毫升定量瓶/取样瓶：专业的为水样与试剂提供溶解环境。

紫外手持式紫外分析仪带暗室：测定大肠埃希氏菌时用于在暗室中观察荧光。

四、操作方法：

第一步：将水样加入100ml取样瓶中，加入酶底物法检测试剂，拧紧盖子摇匀至完全溶解。

第二步：将样品加到定量检测盘中。

第三步：使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。

第四步：粪大肠菌群的测定则将培养箱设定为44.5℃，培养24h。

第五步：对照比色盘数阳性（显黄色，或荧光）格子数，按照使用的检测盘类型，分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数。对照MPN表出数据。

第六步：根据稀释倍数最终结果按公式计算结果。

大肠菌群（个/L）=MPN值×稀释倍数×1000mL/100mL。