酶底物法程控定量封口机是如何检测大肠杆菌？

来源：西安海研生物科技有限公司 | 发布时间：2020/10/22 19:04:37

采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。

加入含有总大肠菌群细菌的水样，放入程控定量封口机中，目标细菌在MinimalMediumONPG-MUG培养基中36℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。

同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解MinimalMediumONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数(MPN)统计模型而设计的半自动定量方法。程控定量封口机自动将样品／试剂混合液分配到独立孔中。培养结束后，阳性孔数可以转化为MPN值。51孔定量盘可检测每100mL水样中1-200MPN值。97孔定量盘可检测每100mL水样中1-2,419MPN值。整个检测过程手工操作时间小于1分钟。

【使用方法】

定性测试：

第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃培养24h；

第二步、结果判读

无色=阴性

黄色=总大肠菌群阳性

黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性

注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性

第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；

第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；

第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封装，36℃培养24h；

第四步、51孔定量检测盘（定量孔板）结果判读：

无色=阴性

黄色格子=总大肠菌群阳性

黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性

查对照MPN表计数

注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。